2月3日，音乐人赵英俊因肝癌医治无效在北京病逝，年仅43岁；同月27日，一代“黄金配角”香港知名演员吴孟达也因肝癌去世，享年68岁。
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在我们为他们的离去感到震惊与惋惜的同时，也不禁感叹肝癌的高发性。
在我国，肝癌发生最常见的原因是感染乙型肝炎病毒（HBV）后引起慢性乙型肝炎，进而转变为肝硬化、肝癌。据统计，全球每年因慢性乙型肝炎引起肝硬化和肝细胞癌的死亡人数超过88.7万人。[1]
慢性乙型肝炎难以被治愈已是公认的事实。大多研究认为这与肝细胞核内HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）过长的半衰期有关，也是HBV难以清除的主要原因。[2]因此，肝内检测cccDNA对评估抗病毒治疗疗效和治疗终点具有重要意义。
但在实际应用中，cccDNA的检测十分困难，通常需要进行肝组织活检，具有创伤性，难以在临床上推广应用。如何真实地评判肝细胞内cccDNA的水平和转录活性，成为临床亟待解决的问题。
近年来，血清HBVRNA一步一步走进了人们的视野。多项研究表明，血清HBVRNA可以真实反映cccDNA转录活性状态，对cccDNA的检测、辅助临床停药管理、优化慢性乙肝患者的治疗策略和临床转归等方面都具有重要意义，近日已有HBVRNA检测试剂获批用于临床，加速了该新指标临床应用。今天检验君就和大家聊一聊HBVRNA与cccDNA的那些事。
血清HBVRNA是如何走进人们视野的？年，德国科学家K?ck和他的同事在研究HBV能否感染人外周血单核细胞时，发现患者血清的游离病毒存在HBVRNA。[3]这也是首次在慢性乙肝患者外周血中检测到HBVRNA的存在。
随后，更多研究者在慢性乙肝患者体内发现了HBVRNA的存在，并试图探究其临床意义。
年，AkinoriRokuhara等人比较了慢性乙肝患者抗病毒药物治疗前后血清HBVRNA水平与HBVDNA、HBV核心相关抗原（HBVcrAg）水平的变化，通过梯度离心的方法证明慢性乙肝患者血清中的HBVRNA存在于由病毒包膜包被的病毒颗粒中。
那么，血清中的HBVRNA是以何种形式而存在，有何特征？
HBVRNA存在形式及组分近年来，国内外学者们对HBVRNA的研究层出不穷，并相继发现这些HBVRNA实质上是核衣壳内未经逆转录的前基因组RNA（pgRNA），这些pgRNA和松弛环状DNA（rcDNA）一样，存在于成熟病毒颗粒的核衣壳内，因此，将这种病毒颗粒称之为“HBVRNA病毒样颗粒”[4,5]。
北京大学医学部病原生物学系鲁凤民教授研究团队在慢性乙肝患者体内检测到大量HBVRNA，并使用NP-40和蛋白酶K处理、蔗糖密度梯度离心法、电子显微镜、Northern杂交、多重PCR以及5Race技术等多种检测技术，揭示了血清中的HBVRNA实质就是存在于核衣壳内未完成或部分完成逆转录的pgRNA。[6]随后多项研究同样证明血清中HBVRNA实质就是pgRNA。[7]
看到这里，相信大家已经对HBVRNA有了初步的了解了。可HBVRNA与肝内cccDNA究竟有何联系？
HBVRNA为何可准确反映肝内cccDNA转录活性？原来，在HBV感染过程中，每个感染肝细胞内存在5~50拷贝cccDNA，作为pgRNA的原始模板，cccDNA会转录为pgRNA，而pgRNA是病毒逆转录及翻译HBV聚合酶和核心蛋白的模板，[8]在核衣壳内聚合酶作用下，pgRNA进行逆转录，转化为rcDNA，然后与病毒蛋白整合成完整的HBV释放到细胞外。[9]
由于pgRNA是HBV病毒颗粒cccDNA直接转录生成，所以理论上HBVRNA的水平能够反映cccDNA的水平和转录活性。近年来多项研究表明，在基线和抗病毒治疗过程中，血清HBVRNA水平依旧能反映肝组织中cccDNA的状态，是cccDNA可靠的临床替代标志物。
Giersch等人通过定量检测血清中的pgRNA，并利用了人源化的HBV感染小鼠进行研究，发现血清pgRNA与肝内的cccDNA水平呈显著性相关，指出血清pgRNA可以作为一个实用的临床替代标记物来评估HBV感染患者肝内持续存在的cccDNA转录活性。[10]
上海医院感染科主任张文宏教授团队研究表明，血清HBVRNA水平的确能反映cccDNA的转录活性，HBVRNA可以作为慢性乙肝患者功能性治愈的新指标。[11]
医院感染科的孙剑教授、侯金林教授团队研究发现，血清HBVRNA中rtMI/V（LAM耐药突变位点）百分比与配对肝活检组织cccDNA中rtMI/V百分比呈显著正相关，表明血清HBVRNA可作为cccDNA序列组成的替代标志物。[12]
ShuyaMatsuda等人对例感染患者的血清HBVRNA进行了定量检测，探究其与临床特征以及HBV标志物的关系，并在接受抗病毒治疗的患者中同时进行了HBVRNA/HBVDNA测序。结果表明，血清HBVRNA可以反映cccDNA转录活性，并与HBcrAg有较好的相关性，HBVRNA的动态变化，有助于了解HBVcccDNA在肝脏中的转换过程。[13]
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这一系列研究都表明，血清HBVRNA对反映真实cccDNA转录活性状态具有重要意义。即使在抗病毒治疗HBV病毒颗粒合成被抑制，血清无法检测出HBVDNA时，几乎所有患者血清HBVRNA仍然检出阳性。
作为病毒复制模板cccDNA的直接转录产物，HBVRNA的确能很好反映HBVcccDNA的转录活动状态，有力补充现有“经典指标”HBVDNA和HBsAg的不足，可更加真实地反映慢乙肝患者病情进展和抗病毒治疗效果，指导临床治疗和判断预后。
结语随着对HBVRNA研究的不断深入，人们发现HBVRNA与慢性乙肝患者病情进展有着密切的关系，对临床指导意义日益受到临床医生的广泛
